蛋白纯化系统是一种用于基础医学领域的医学科研仪器,于2011年12月06日启用。
蛋白纯化系统的主要功能:
快速、高质量的蛋白质分离,并同时为灵活性和工艺可靠性提供一种完整的解决方案,主要使用大子用于蛋白等生物大分子纯化及方法优化可用于填料筛选方法优化和工艺放大,以及微克至数十克级别生物活性物质的分析和制备
蛋白纯化系统的原理:
一.分子筛(凝胶层析)
原理:用一般的柱层析方法使相对分子质量不同的溶质通过具有分子筛性质的固定相(凝胶),从而使蛋白质分离。
二.亲和层析
原理:亲和层析是一种吸附层析,亲和层析利用固相介质中的配基与混合生物分子之间亲和能力不同而进行分离,当蛋白混合液通过层析柱时,与配基能够特异性结合的蛋白质就会被吸附固定在层析柱中,其他的蛋白质对配体不具有特异性的结合能力,将通过柱子洗脱下来,这种结合在一定条件下是可逆的,选用适当的洗脱液,改变缓冲液的离子强度和pH 值或者选择更强的配体结合溶液将结合的蛋白质洗脱下来,而无亲和力的蛋白质最 先流出层析柱。
三.离子交换层析
原理:离子交换层析根据样品表面电荷不同进行分离纯化的技术,根据不同蛋白样品在同一Ph条件下所带电荷正负以及带电荷量不同而将不同蛋白样品分离。
适用范围:适合任何带点生物分子的初步纯化,除去杂质和提纯。
四.高效液相层析
原理:储液器中的流动相被高压泵打入系统,样品溶液经进样器进入流动相,被流动相载入色谱柱(固定相)内,由于样品溶液中的各组分在两相中具有不同的分配系数,在两相中作相对运动时,经过反复多次的吸附-解吸的分配过程,各组分在移动速度上产生较大的差别。适用范围:高效液相色谱更适宜于分离、分析高沸点、热稳定性差、有生理活性及相对分子量比较大的物质。
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