蛋白纯化系统的简介

蛋白纯化系统在生物化学研究应用中使用广泛，是一项重要的操作技术。

蛋白纯化系统要利用各种蛋白间的相似性来除去非蛋白物质的污染，利用各蛋白质的差异将目的蛋白从其他蛋白中纯化出来，大致分为粗分离阶段和精细纯化阶段二个阶段。

蛋白质的分离纯化在生物化学研究应用中使用广泛，是一项重要的操作技术。

一个典型的真核细胞可以包含数以千计的不同蛋白质，一些含量十分丰富，一些仅含有几个拷贝。为了研究某一个蛋白质，必须首先将该蛋白质从其他蛋白质和非蛋白质分子中纯化出来。用于分离蛋白质的最重要特性有大小、电荷、疏水性和对其他分子的亲和性。蛋白纯化系统通常采用多种方法的组合来实现蛋白质的完全纯化。其蛋白质分离纯化主要方法包括：

　　（1） 根据分子大小不同的分离方法：透析和超过滤（利用蛋白质分子不能通过半透膜）；密度梯度离心（蛋白质在介质中离心时质量和密度较大的颗粒沉降较快）；凝胶过滤(一种柱层析)

　　（2） 利用溶解度差别分离：等电点沉淀法）由于蛋白质分子在等电点时净电荷为零，减少了分子间静电斥力，因而容易聚集沉淀，此时溶解度最小)；盐溶与盐析(利用一定浓度盐溶液增大或减小蛋白质的溶解度)

　　（3） 根据电荷不同的分离方法，主要包括电泳和离子交换层析分离；

　　（4） 蛋白质的选择吸附分离（利用颗粒吸附力的强弱不同达到分离目的）

　　（5） 根据配体特性的分离——亲和层析（利用蛋白质分子与另一种称为配体的分子能够特异而非共价地结合这一生物性质）